核酸检测,作为精准医疗的“火眼金睛”,近年来在IVD领域,尤其是分子诊断POCT(即时检验) 上发展迅猛。当前核酸检测的主要是 qPCR技术。它凭借超高的特异性、灵敏度以及定量能力,被公认为分子检测的“金标准”,也是实现高通量检测的利器。然而,在过程中依赖变温qPCR仪器、检测耗时长以及特定实验室环境的要求极大地限制了qPCR技术在基层医疗机构推广和现场快速检测中的应用。LAMP技术,以其颠覆性的优势(恒温操作、检测时间快以及对实验室基础设施要求低等优势)在POCT领域脱颖而出,让核酸检测变得更快速、更简便、更经济、更易于在基层和现场部署!
近岸蛋白上新LAMP探针法试剂盒LAMP Fast Probe Kit(目录号:E323),采用经基因工程改造的 Bst 2.0 plus DNA 聚合酶(目录号:E033),搭配特殊优化的反应体系,可高特异性、高灵敏度地实现探针法LAMP,能够用于检测样品中的 DNA。与Bst 2.0 DNA聚合酶相比,Bst 2.0 plus DNA聚合酶表现出更高的扩增速度、产量和灵敏度等优点。配合优化的反应缓冲液,可抑制非特异性扩增,显著提升扩增效率,只需加入引物探针和模板即可, 通常在30 min内便可得到扩增结果。检测通过荧光信号实时监测,灵敏度高,重复性好。
产品三大亮点
分钟级快检
30分钟内获得指数级扩增,荧光信号同步释放
零背景干扰
探针精准切割,假阳性无处藏身
多重应用
适配病原体检测,多重场景精准覆盖
性能展示
01 高效的扩增性能
以嗜热芽孢杆菌基因组(GC~50%)为模板进行10倍梯度稀释,使用近岸蛋白E323和市售品牌A同类产品进行检测。结果显示,近岸蛋白E323的反应速度快于品牌A;检测灵敏度上,近岸蛋白E323和品牌A均能检测到10 copies/test 靶标DNA。

图1红色曲线:近岸蛋白E323;粉紫色曲线:品牌A。浓度梯度依次为:1-1.0E05 copies/Test、2-1.0E04 copies/Test、3-1.0E03 copies/Test、4-1.0E02 copies/Test、5-1.0E01 copies/Test、6-NTC
02 高特异性
对2份无酶水进行检测,24个重复均无异常起峰,排除假阳性干扰。因此近岸蛋白E323在抑制非特异扩增上性能更好。

图2 阴性水(NTC)对照检测
03 重复性好
以嗜热芽孢杆菌基因组(GC~50%)为模板1.0E03 copies浓度下做10次重复试验。结果显示,所有扩增曲线拟合度高,表明扩增效率一致;CV值均小于3%,表明实验具有良好的重复性和数据一致性,检测结果稳定可靠。

图3 近岸蛋白E323的重复性试验结果
04 稳定性
在LAMP体系中测试E323热加速后的试剂与-20℃正常保存试剂的性能。结果显示:E323试剂经37℃热加速处理7天的检测性能与-20℃保存的试剂高度吻合(阳性样本检出率维持稳定-Ct值偏差≤0.5),且反应体系未出现非特异性扩增条带或假阳性信号,表现出优异的稳定性。

图4 近岸蛋白E323的加速稳定性试验结果(红色曲线:E323 37℃ 7d;绿色曲线:E323-20℃)
近岸蛋白解决方案
面对将样品运输到专业实验室成本高昂、地理位置不便、存在时间敏感等限制的情况,为了满足客户对多元化POCT解决方案的持续需求,近岸蛋白推出了基于恒温扩增LAMP的系列产品(LAMP检测方法选择指南,近岸蛋白解锁“快准稳”全场景方案)。为了让大家更好的选择合适的产品,从方法学上整理出了不同产品之间的差异,大家可根据需求选择适合的产品。
